液相色譜柱的系統(tǒng)由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運(yùn)動時(shí),經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
液相色譜柱在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)基線漂移的原因
1、柱溫波動。
解決方法：控制好柱子和活動相的溫度，檢查是否有打開的窗戶或空調(diào)對著柱溫箱。
2、流通池被污染或有氣體。
解決方法：用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸。
3、紫外燈能量不足。
解決方法：更換新的紫外燈。
4、活動相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成。
解決方法：檢查活動相的組成，使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級的溶劑。
5、樣品中有強(qiáng)保存的物質(zhì)以饅頭峰樣被洗脫出，從而表現(xiàn)出一個(gè)逐步升高的基線。
解決方法：使用保護(hù)柱，如有必要，在進(jìn)樣之間。在分析過程中，定期用強(qiáng)溶劑沖洗柱子。
6、檢測器沒有設(shè)定在吸收波優(yōu)點(diǎn)。
解決方法：將波長調(diào)整至吸收波優(yōu)點(diǎn)。
7、活動相的PH值沒有調(diào)節(jié)好。
液相色譜柱漂移保存時(shí)間重現(xiàn)是液相性能好壞的一個(gè)重要標(biāo)志，同一種東西，兩次的保存時(shí)間相差不要超過15s，超過了半分鐘可看做保存時(shí)間漂移，就無法進(jìn)行定性，你要考慮以下原因：
1、溫控不當(dāng)。解決方法：調(diào)好柱溫，檢查是否有打開的窗戶或空調(diào)對著柱溫箱。
2、活動相比例變化。解決方法：檢查四元泵的比例閥是否有故障。
3、色譜柱沒有平衡。解決方法：在每一次運(yùn)行之前給予足夠的時(shí)間平衡色譜柱。
4、流速變化。解決方法：重新設(shè)定流速。
5、泵中有氣泡。解決方法：從泵中除往氣泡。
